細(xì)胞周期（cell cycle）是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng) 歷的全過程，分為間期與分裂期兩個階段。細(xì)胞分裂時期即 M 期，是細(xì)胞形態(tài) 結(jié)構(gòu)發(fā)生急速變化的時期，包括一系列核的變化、染色質(zhì)的濃縮、紡錘體的出現(xiàn)， 以及染色體精確均等地分配到兩個子細(xì)胞中的過程，使分裂后的細(xì)胞保持遺傳上 的一致性?，F(xiàn)在已知從酵母到人類的所有真核細(xì)胞的 M 期啟動是受同一機制調(diào) 控，即 MPF，其生化本質(zhì)是蛋白激酶，可催化若干種蛋白發(fā)生磷酸化，從而引 起這些蛋白的結(jié)構(gòu)和功能狀態(tài)的改變，而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)代謝活動的變化，有活性的 MPF 實質(zhì)是由 p34CDK2 和 Cyclin 兩部分組成。p34CDK2 是 cdc2 基因的產(chǎn)物 p34CDK2 蛋白，其單獨存在時無激酶活性，當(dāng)進(jìn)入 M 期與細(xì)胞周期蛋白 cyclin 結(jié)合形成復(fù)合體，然后由 week/mik1 激酶和 CDK 激酶催化 CDK 上的 Tyr14、 Tyr15、Tyr161 磷酸化，隨后在磷酸化酶 Cdc25c 的催化下，使前兩者發(fā)生去磷 酸化，從而表現(xiàn)出活性。深入研究已知，這類蛋白激酶復(fù)合體對細(xì)胞周期運行有 重要作用，被喻為細(xì)胞周期運轉(zhuǎn)的引擎，P34CDK2 激酶類型又稱為周期蛋白依 賴性激酶 CDK，現(xiàn)在已知 11 種編碼 CDK 的基因，各種 CDK 蛋白的作用時期不 同，它們在細(xì)胞周期中含量不出現(xiàn)波動，僅發(fā)生去磷酸化與磷酸化的周期性變化 的規(guī)律改變，故使得 CDK 激酶活性出現(xiàn)周期變化，從而導(dǎo)致細(xì)胞中一系列事件 的發(fā)生。

CDK1(細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶 1)是一個高度保守的 Ser/Thr 蛋白激酶，在 細(xì)胞周期循環(huán)中起著重要的作用。在人體內(nèi)，Cdk1 是由 CDC2 基因編碼，與 cyclin 形成復(fù)合物磷酸化一系列的目標(biāo)底物（已知在出芽酵母中超過 75 種蛋白），從 而導(dǎo)致細(xì)胞周期循環(huán)的發(fā)生。

由于 CDK1 的高度保守，它的功能在出芽酵母中研究的比較清楚。在出芽 酵母中，細(xì)胞循環(huán)的起始是由兩個調(diào)節(jié)復(fù)合物控制 SBF (SCB-binding factor) and MBF (MCB-binding factor)。這兩個復(fù)合物控制 G1/S 期的基因轉(zhuǎn)錄，然而正常情 況下這兩個復(fù)合物是失活的，SBF 被 Whi5 蛋白抑制，當(dāng)被 Cln3-Cdk1 磷酸化后， Whi5 從核子中釋放，從而允許 G1/S 期的基因得以轉(zhuǎn)錄。

CDK1 蛋白在細(xì)胞周期循環(huán)中同樣受到高度調(diào)節(jié)，顯然地它的調(diào)節(jié)與它的復(fù) 合物的參與者 cyclin 息息相關(guān)。Cyclin 的結(jié)合改變了 CDK1 的激活位點，從而導(dǎo) 致 CDK1 的激活。除了受到 Cyclin 的調(diào)節(jié)之外，CDK1 還受磷酸化的調(diào)節(jié)，一 個保守的 Tyr 蛋白激酶可以抑制 CDK1。CDK1-Cyclin 復(fù)合物還受 CKIs 抑制劑 蛋白的控制，從而周期性的控制細(xì)胞循環(huán)的發(fā)生和關(guān)閉。

圖 1：細(xì)胞周期循環(huán)圖

鑒于 CDK1 在細(xì)胞循環(huán)周期調(diào)節(jié)中的重要性，我們利用反轉(zhuǎn)錄方法獲得 CDK1 的基因，成功克隆并在大腸桿菌中表達(dá)了 CDK1 蛋白。利用親和層析方法 獲得了蛋白純度超過 95%的重組蛋白(貨號：RPB888Hu01)，如圖 2 所示 （MW=13.5KD）。用純化得到的重組蛋白免疫兔子，獲得了 CDK1 的多克隆抗 體血清，并利用親和層析純化的方法獲得了針對 CDK1 的特異性抗體（貨號： PAB888Hu01）。

獲得親和純化的抗體后，我們通過 western blot 對其組織特異性進(jìn)行檢測， 結(jié)果如圖 3 所示(33KD，與 Uniprot 中已知的分子量大小相當(dāng)）。特異性的抗體和 高純度的重組蛋白相信會給研究人員帶來好的研究結(jié)果。 CDK1 的表達(dá)異常和腫 瘤以及癌癥的發(fā)生有關(guān)，因此快速準(zhǔn)確的檢測細(xì)胞中的表達(dá)含量對于與之相關(guān)的 癌癥研究非常重要，為方便廣大科研工作者，我們推出了 human CDK1 的 Elisa 試劑盒(貨號：SEB888Hu)，可以快速準(zhǔn)確的檢測組織和細(xì)胞中的蛋白含量，給 研究者提供研究依據(jù)，方便廣大科研人員的使用。 

講到這里，細(xì)胞周期調(diào)控蛋白的重要性不言而喻，CDK1 作為蛋白激酶家族 的一員，獲得其專一性的磷酸化抗體對研究人員是必不可少的研究工具，對于生 物研究人員來說，好的工具是研究成功的一半。關(guān)于優(yōu)爾生 CDK1 的磷酸化抗體 故事，我們在以后的專題中做專門介紹。