-
多因子檢測試劑盒(Multiplex Assay Kit)磁珠讀數(shù)異常原因及解決方案
基于流式熒光法的多因子檢測技術是在不同顏色或大小的編碼微球上包被不同的特異性抗體,以達到單個樣本可同時檢測多個靶標因子,從而實現(xiàn)高通量的蛋白定量技術。云克隆公司有十多年的蛋白、抗體和ELISA試劑盒的研發(fā)經(jīng)驗,通過采用和ELISA一致的抗體對篩選和試劑優(yōu)化體系,在此基礎之上開發(fā)出了更高標準和更高性能的多因子檢測試劑盒(Multiplex Assay Kit),力求為客戶提供更便利更全面的分析工具。多因子檢測試劑盒自上市以來備受科研工作者的青睞,但由于和ELISA的操作方法大有不同,大家在使用過程中可能會遇到各種操作方面的問......
-
多因子試劑盒標曲擬合
多因子檢測技術是一種基于流式熒光法的多重檢測技術,一次實驗可同時檢測多個靶標分子,適用于蛋白質(zhì)、小分子、多肽等靶標的檢測。相比傳統(tǒng)的單因子檢測方法,多因子檢測技術具有高通量、高靈敏度和特異性好的特點,同時還能節(jié)省樣本,提高檢測效率,有著廣泛的應用前景。流式熒光法多因子檢測的免疫學原理與普通酶聯(lián)免疫吸附實驗相似,但信號檢測系統(tǒng)有所不同。多因子檢測也可以分為雙抗夾心和競爭法。雙抗夾心法是通過將已知的抗體偶聯(lián)在熒光微球表面,待測抗原與偶聯(lián)的抗體反應,加入生物素化的檢測抗體,形成雙抗夾心的結(jié)構,最......
-
細胞微囊泡——外泌體
外泌體是一種直徑為30至150nm的膜分泌型囊泡狀結(jié)構,其拓撲結(jié)構與細胞類似,并富含特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸和多糖復合物。這些微小的細胞器由幾乎所有類型的細胞產(chǎn)生并釋放,自然存在于多種體液中,如腦脊液、唾液、肺泡灌洗液、乳汁、尿液和血液等。外泌體的生成過程是通過細胞膜上的出芽方式進行的,其中含有一系列與細胞膜密切相關的高階寡聚蛋白復合物,展現(xiàn)出顯著的分子異質(zhì)性。這一過程不僅是蛋白質(zhì)質(zhì)量控制的重要機制,而且外泌體在釋放到細胞外后,具備多重生物活性,如重塑細胞外基質(zhì)、向其他細胞傳遞信號和分子等。這種......
-
HepG2-luc穩(wěn)定細胞系助力實驗研究
熒光素酶(luciferase)在一定條件下可以催化熒光素(luciferin),產(chǎn)生自發(fā)光現(xiàn)象(如圖1)。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱。目前比較常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶,海螢熒光素酶等。螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶組成的雙報告系統(tǒng)在基因的表達調(diào)控、信號通路的轉(zhuǎn)導作用、高通量藥物篩選、siRNA和miRNA篩選等多個研究領域發(fā)揮重要作用。 圖1. 熒光素酶與熒光素的發(fā)光反應螢火蟲熒光素酶是目前研究中使用最為廣泛的熒光素酶。它由550個氨基酸組成,翻譯......
-
云克隆教你出完美Western Blot條帶
在Western Blot(WB)的實驗過程中,總會遇到各種各樣的問題:沒有條帶,雜帶多,轉(zhuǎn)膜不成功,曝光時間把握不好……WB實驗周期長,操作步驟繁瑣。怎么在繁瑣的操作中快速找到問題所在是很多科研人員頭疼的問題。不要急,云克隆用多年積攢的WB實驗經(jīng)驗,為你分析解決WB實驗過程中出現(xiàn)的各種狀況。一、SDS-PAGE出現(xiàn)異常條帶1. 微笑現(xiàn)象可能原因:凝膠的中間部分凝固不均導致。解決辦法:待其充分凝固后再做實驗。2.拖尾現(xiàn)象可能原因:樣品融解效果不佳;電泳緩沖液時間過長;分離膠濃度過大引起。解決辦法:加樣前離心;加適量樣品促溶......
-
除疤大作戰(zhàn) — 減少疤痕形成的新思路
疤痕很常見,在生活中磕磕碰碰就可能留下疤痕。然而疤痕一旦形成,則很難去除,目前醫(yī)學界仍無法完全消除疤痕。近期,有篇關于減少疤痕形成的研究登陸國際頂級期刊《Nature Communications》,為除疤提供了新的思路。 內(nèi)皮細胞向間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EndMT)是導致器官組織纖維化和疾病的主要原因,然而其機制尚未闡明。內(nèi)皮細胞具有強大的適應和重組的再生能力,這是由于血管內(nèi)祖細胞(EVP)控制著內(nèi)皮細胞的層次結(jié)構。通過分析,研究團隊發(fā)現(xiàn)兩個轉(zhuǎn)錄因子SOX9和RBPJ特異性地影響小鼠EVP的數(shù)量和調(diào)節(jié)譜系特化。當從小鼠血管系統(tǒng)(Sox9fl......
-
抑郁癥—致命的“心理感冒”
根據(jù)世界衛(wèi)生組織(World Health Organization, WHO)的統(tǒng)計,目前全球有超過3億人飽受抑郁的困擾。抑郁是一種情緒低落和悲觀厭世的狀態(tài),就如同心理患上感冒,其主要癥狀表現(xiàn)為情緒低落、抑郁悲觀、反應遲鈍、思考困難、記憶力下降、注意力不集中、食欲和睡眠時間顯著增加或減少等。而當“心理感冒”加重時,患者會感到沮喪、絕望,甚至會萌生自殺的念頭。每年有百萬人因抑郁致死,且因抑郁癥死亡的人數(shù)呈逐年增長的趨勢,抑郁癥目前已成為僅次于癌癥的第二大殺手。圖1. 21種抗抑郁藥的療效及耐受度坐標圖(圖片來源:《Nature Neuros......
-
與免疫細胞并肩作戰(zhàn)的逆行者
當機體受到外來入侵者攻擊時,由免疫細胞組成的免疫系統(tǒng)能夠有效的防御外來入侵者。大家可能不知道,除了免疫細胞們,機體內(nèi)抵御病原體的逆行者們還有這幾種結(jié)構細胞——成纖維細胞、上皮細胞和內(nèi)皮細胞。這些結(jié)構細胞不僅僅是器官的支架,它們還能與免疫細胞進行交流,參與抗病毒防御。Krausgruber等人在《自然》雜志上報道了一項對小鼠體內(nèi)多器官結(jié)構細胞基因表達的檢測,揭示了這些細胞在機體防御外來入侵者的信號網(wǎng)絡中的作用,且結(jié)構細胞對外來入侵者的防御反應具有器官特異性。圖1通過分析發(fā)現(xiàn),小鼠體內(nèi)的成纖維細胞、內(nèi)皮細胞......