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神經(jīng)退行性疾病逆生長(zhǎng)的關(guān)鍵——神經(jīng)細(xì)胞的分化
神經(jīng)退行性疾病跟神經(jīng)元和(或)其髓鞘的喪失有關(guān),隨著時(shí)間的推移,疾病惡化,導(dǎo)致出現(xiàn)功能障礙。常見的神經(jīng)退行性疾病包括帕金森病(PD)、阿爾茨海默病(AD)、亨廷頓?。℉D)、肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)、不同類型脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)(SCA)等。長(zhǎng)期以來,人們都以為成年哺乳動(dòng)物腦內(nèi)的神經(jīng)細(xì)胞一旦受損,不能再生,導(dǎo)致神經(jīng)退行性疾病的治療受到了很大限制。當(dāng)前治療的原則是改善癥狀和減緩疾病進(jìn)一步發(fā)展。近年來,神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域取得重大進(jìn)展,特別是對(duì)成年腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cell,NSC)再生機(jī)制的研究具有重大意義......
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免疫磁珠分選
介紹:免疫磁珠分選,是基于抗原抗體特異性識(shí)別的原理,使用高度特異性單克隆抗體偶聯(lián)的磁化微粒對(duì)目的細(xì)胞進(jìn)行特異性的磁性標(biāo)記。通過高強(qiáng)度、梯度磁場(chǎng)從而達(dá)到細(xì)胞磁性分離的目的。可應(yīng)用范圍:特定表型的細(xì)胞特定細(xì)胞因子分泌細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞凋亡細(xì)胞磁珠分選特點(diǎn):ü磁珠分選后可獲得高純度(大于90%)、高得率的目的細(xì)胞。ü磁化微粒和分選柱對(duì)細(xì)胞無毒性、無損傷,可生物降解。純化后細(xì)胞不影響活性和功能。ü除目的細(xì)胞外的其它細(xì)胞群均可回收利用。ü可實(shí)現(xiàn)10e5到10e11總細(xì)胞數(shù)的分選。ü與流式細(xì)胞儀兼容,不影響細(xì)胞光學(xué)特效、不......
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微載體培養(yǎng)技術(shù)在抗體生產(chǎn)中的應(yīng)用
微載體培養(yǎng)技術(shù)是一種細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù),通過攪拌培養(yǎng)液,使微載體懸浮,促使細(xì)胞在微載體表面增殖并成單層分布。微載體是指直徑為60-250μm的微球,具有無毒性,密度均一等特點(diǎn),可用于貼壁依賴性細(xì)胞貼附在微球表面單層生長(zhǎng),有效地?cái)U(kuò)增了細(xì)胞貼附面積,有利于大規(guī)模細(xì)胞的培養(yǎng),常被用于生產(chǎn)疫苗,基因工程藥物等。利用傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方案,如腹腔培養(yǎng)和搖瓶培養(yǎng),無法滿足工業(yè)級(jí)客戶的抗體需求量(克級(jí))。云克隆利用成熟的微載體培養(yǎng)技術(shù)和生物反應(yīng)器系統(tǒng),通過不斷加入新鮮培養(yǎng)基并不斷抽走含細(xì)胞代謝廢物的消耗培養(yǎng)基,使雜......
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單克隆抗體大規(guī)模制備技術(shù)
抗體制備技術(shù)大體經(jīng)歷3個(gè)發(fā)展階段。第一階段:利用高等脊椎動(dòng)物制備抗血清即多克隆抗體制備技術(shù);第二階段:借助小鼠骨髓瘤細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)以及細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展建立起來的小鼠單抗制備技術(shù);第三個(gè)階段:隨著基因測(cè)序以及基因文庫(kù)篩選技術(shù)發(fā)展起來的重組抗體制備技術(shù)。第一階段的多克隆制備技術(shù)通常不具有大規(guī)模制備抗體的潛力,而且制備的抗體組成成分復(fù)雜,實(shí)用性較差。第二階段的單克隆抗體制備技術(shù)實(shí)質(zhì)上是融合細(xì)胞株構(gòu)建和發(fā)酵工程的綜合應(yīng)用,將抗體的制備從生物體內(nèi)移動(dòng)到發(fā)酵罐中,為抗體的大規(guī)模制備提供了基礎(chǔ)。第三階段的......
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雞能生“金蛋”嗎?云克隆有好辦法!
雞可以生“金蛋”嗎?似乎雞生金蛋只出現(xiàn)在童話故事中。而云克隆新研發(fā)的雞抗制備技術(shù),讓母雞“生”出比黃金貴得多的“抗體”蛋??贵w,作為生命科學(xué)研究中最常用的“示蹤劑”,通常市價(jià)是黃金的100-1000倍。1克黃金的價(jià)格在300元左右,而0.1克抗體的售價(jià)為1000到2000元左右。一只“抗體”蛋蛋黃中含有大約0.3g抗體。這就是云克隆的生“金蛋”雞??贵w的制備最常用的動(dòng)物是兔,但是兔與人、大鼠、小鼠等物種均屬于哺乳類動(dòng)物,雖然大部分的蛋白差異是較大的,但是總有一些如“管家基因”編碼的蛋白在各種哺乳動(dòng)物中是極相似的,這些蛋白,由于結(jié)......
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慢病毒和腺病毒表達(dá)系統(tǒng)
借助于病毒顆粒作為基因的載體,利用病毒的侵染特性,自發(fā)的侵染哺乳動(dòng)物細(xì)胞,將目的基因?qū)氩溉閯?dòng)物細(xì)胞中,以完成目的產(chǎn)物的超量表達(dá)或干涉。該技術(shù)目前在基因、小RNA、轉(zhuǎn)錄因子等功能驗(yàn)證領(lǐng)域以及重組蛋白表達(dá)、轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物制備等領(lǐng)域作為一種主要的技術(shù)手段被廣泛使用。該技術(shù)體系主要由病毒包裝和病毒侵染篩選兩個(gè)部分組成(如圖所示)。病毒包裝就是借助基因工程的方法將目的基因片段與人為改造病毒的基因組通過特殊的位點(diǎn)連接起來形成重組病毒基因組以及重組病毒制備的過程,常規(guī)使用的病毒包裝系統(tǒng)有慢病毒包裝系統(tǒng)和......
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蛋白/抗體的常用標(biāo)記方法介紹
為研究蛋白的性質(zhì)、含量、結(jié)構(gòu)與功能,以及為了方便對(duì)抗原抗體特異性結(jié)合的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行觀察和檢測(cè),通常會(huì)選擇利用一些易測(cè)定又具有高度敏感性的物質(zhì)作為標(biāo)記物標(biāo)記抗原,然后通過檢測(cè)這些標(biāo)記物的增強(qiáng)放大效應(yīng)而產(chǎn)生的顏色變化、光譜變化等來達(dá)到研究目的。即利用抗原中氨基酸殘基的特殊理化性質(zhì),在特定的條件下使蛋白/抗體與標(biāo)記物結(jié)合,形成蛋白/抗體標(biāo)記物。標(biāo)記抗原原理示意圖如下:標(biāo)記蛋白一般可采用酶標(biāo)記、生物素標(biāo)記、熒光標(biāo)記以及C13和N15全蛋白標(biāo)記等方式。標(biāo)記抗體一般可采用酶標(biāo)記、生物素標(biāo)記、熒光標(biāo)記以及膠體金......
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熒光抗體染料大集合
染料在生物化學(xué)中最早的應(yīng)用是直接對(duì)切片進(jìn)行染色,然后進(jìn)行觀察。隨著生物技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)以及熒光光譜測(cè)定技術(shù)的不斷發(fā)展,許多染料尤其是熒光染料在細(xì)胞檢測(cè)、腫瘤基因蛋白分析、毒物分析、臨床醫(yī)療診斷等方面得到了廣泛的應(yīng)用。熒光染料泛指吸收某一波長(zhǎng)的光波后能發(fā)射出另一大于吸收光波長(zhǎng)的光波的物質(zhì)。利用熒光染料進(jìn)行抗體標(biāo)記分析在現(xiàn)代生物免疫學(xué)領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛,并逐步顯示出明顯的優(yōu)越性。下面簡(jiǎn)要介紹應(yīng)用于標(biāo)記抗體的熒光染料及其種類:1. 熒光素類染料,包括異硫氰酸熒光素(FITC)、 羥基熒光素(FAM)、四氯熒光素(TE......