微載體培養(yǎng)技術(shù)在抗體生產(chǎn)中的應(yīng)用
微載體培養(yǎng)技術(shù)是一種細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù),通過(guò)攪拌培養(yǎng)液,使微載體懸浮,促使細(xì)胞在微載體表面增殖并成單層分布。微載體是指直徑為60-250μm的微球,具有無(wú)毒性,密度均一等特點(diǎn),可用于貼壁依賴性細(xì)胞貼附在微球表面單層生長(zhǎng),有效地?cái)U(kuò)增了細(xì)胞貼附面積,有利于大規(guī)模細(xì)胞的培養(yǎng),常被用于生產(chǎn)疫苗,基因工程藥物等。
利用傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方案,如腹腔培養(yǎng)和搖瓶培養(yǎng),無(wú)法滿足工業(yè)級(jí)客戶的抗體需求量(克級(jí))。云克隆利用成熟的微載體培養(yǎng)技術(shù)和生物反應(yīng)器系統(tǒng),通過(guò)不斷加入新鮮培養(yǎng)基并不斷抽走含細(xì)胞代謝廢物的消耗培養(yǎng)基,使雜交瘤細(xì)胞在相對(duì)穩(wěn)定的生長(zhǎng)環(huán)境內(nèi)增殖,實(shí)現(xiàn)了雜交瘤細(xì)胞體外大規(guī)模高密度培養(yǎng),并有效地提高了單位培養(yǎng)液中抗體的濃度,從而得到大批量的穩(wěn)定的抗體產(chǎn)品,見(jiàn)圖1。
表1.單克隆抗體制備工藝比較
腹腔培養(yǎng) | 傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng) | 微載體懸浮培養(yǎng) | |
費(fèi) 用 | 低 | 高 | 低 |
抗 體 效 價(jià) | 不穩(wěn)定, 重復(fù)性低 | 穩(wěn)定, 重復(fù)性高 | 穩(wěn)定, 重復(fù)性高 |
抗 體 產(chǎn) 量 | 5-20mg/mL (腹水:10-20ml) | 0.1-1mg/mL (培養(yǎng)液:1L) | 1mg/mL (培養(yǎng)液:3.5L) |
周 期 | 10-15天 | 3天 | 3天 |
動(dòng)物福 利倫理 | 不符合 | 符合 | 符合 |
儀 器 | —— | —— | 生物反應(yīng)器系統(tǒng) |
動(dòng)物病 毒污染 | 風(fēng)險(xiǎn)大 | 無(wú) | 無(wú) |
對(duì)比傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)法和腹腔培養(yǎng)法,微載體培養(yǎng)技術(shù)優(yōu)勢(shì)明顯,見(jiàn)表1。通過(guò)微載體培養(yǎng)技術(shù)的引入以及雜交瘤細(xì)胞“種子庫(kù)”庫(kù)存積累,云克隆可以源源不斷地為工業(yè)級(jí)客戶提供高品質(zhì)且重復(fù)性佳的抗體產(chǎn)品。另外,云克隆的重組抗體產(chǎn)品也正在研制中,敬請(qǐng)期待!
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