舉世矚目的 2014 年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)揭曉，美國(guó)和德國(guó)科學(xué)家艾力克·貝齊格（Eric Betzig）、斯特凡·W·赫爾（Stefan W. Hell）和威廉姆·E·莫爾納爾（W. E. Moerner） 以其主要貢獻(xiàn)——使用熒光分子將光學(xué)顯微技術(shù)帶入納米層次，從而突破了自從 1873 年前為光學(xué)顯微制定的 0.2 微米的物理極限，獲得了這項(xiàng)殊榮。

本次獎(jiǎng)項(xiàng)針對(duì)的主要研究之一是 Eric Betzig 和 W. E. Moerner 的單分子熒光顯 微技術(shù)。該技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于各研究領(lǐng)域，在生物學(xué)研究中，該技術(shù)也得到了長(zhǎng)足的 應(yīng)用，例如：研究神經(jīng)突觸的形成過(guò)程，各種疾病研究中特定蛋白的聚集和降解過(guò) 程，藥物在細(xì)胞內(nèi)的代謝過(guò)程等等。在這些研究中常用的熒光標(biāo)記分子有： 異硫 氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）, 菁類染料（cyanine dyes, Cy2, Cy3, Cy5）等。

Cloud-Clone Corp.公司在自主制備的普通單克隆抗體和多克隆抗體的基礎(chǔ)上 研制了多種標(biāo)記抗體，例如：生物素（biotin），辣根過(guò)氧化物酶（horse radish peroxidase, HRP）和異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）標(biāo)記抗體 等。其中的 FITC 熒光標(biāo)記抗體就可以應(yīng)用于免疫組織化學(xué)（Immunonological Histological Chemistry, IHC)，細(xì)胞免疫熒光(Immunofluorescence)，小動(dòng)物活體熒光 顯微觀察等實(shí)驗(yàn)中。

FITC 標(biāo)記抗體在 IHC 中的應(yīng)用，以 FITC 標(biāo)記的人前梯度蛋白 2 單克隆抗體 MAC285Hu81 為例，其應(yīng)用于人胃癌組織進(jìn)行 IHC 檢測(cè)，熒光顯微鏡下觀察結(jié)果 如圖 1 所示。

圖 1. MAC285Hu81 熒光 IHC 檢測(cè)結(jié)果

FITC 標(biāo)記抗體在細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用，以 FITC 標(biāo)記的 RAS 相關(guān)蛋白 RAB5A 單克隆抗體 MAK305Hu81 為例，該抗體以及細(xì)胞核染料 4',6-二脒基-2-苯 基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole, DAPI) 應(yīng)用于小 鼠骨髓來(lái) 源的巨噬細(xì) 胞 （bone marrow-derived macrophages, BMDM）進(jìn)行細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)，顯微鏡下觀 察結(jié)果展示在圖 2，3 中。

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