二抗是指針對(duì)抗體的抗體，即是利用抗體是大分子蛋白質(zhì)，具有免疫原性， 用其免疫異種動(dòng)物，促使其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對(duì)此抗體的免疫球蛋白。二抗的主 要作用是特異性結(jié)合一抗，并配合一抗用于免疫實(shí)驗(yàn)，起到放大信號(hào)的作用。在 免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中，二抗起著舉足輕重的作用，二抗的選擇是決定了整個(gè)實(shí)驗(yàn)的成 敗。一般來(lái)說(shuō)，選擇合適的二抗需要綜合考慮一下幾個(gè)方面。

1. 一抗的種屬來(lái)源和類型

在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中，一抗用于特異性是被待測(cè)的目的抗原，由于一抗是否與 目的抗原結(jié)合用肉眼無(wú)法分辨，而二抗可以與一抗結(jié)合，并帶有可以被檢測(cè)出 的標(biāo)記，其作用就是特異性識(shí)別一抗?；诙沟淖饔?，選擇二抗時(shí)，需首先 了解一抗的具體信息。

對(duì)于多克隆抗體（主要有 lgG 類免疫球蛋白組成），選擇二抗時(shí)只需考慮一 抗的種屬來(lái)源。例如，如果試驗(yàn)中一抗是兔源的多克隆抗體，二抗則選用抗兔 IgG 的二抗。即根據(jù)一抗的物種來(lái)源選擇相應(yīng)的抗該物種 IgG 的二抗。公司自主 研發(fā)了抗不同物種 IgG 的二抗，包括抗人、小鼠、大鼠、兔、豚鼠、貓、狗、 豬、牛、山羊、馬和雞。

對(duì)于單克隆抗體，除了需考慮種屬因數(shù)，還需了解一抗的類和亞類。如果 一抗是小鼠 IgM, 那么則二抗則應(yīng)選用 IgM；如果一抗是小鼠 IgG 的某一亞類， 如 IgG1, 二抗則需選用抗小鼠 IgG 或抗小鼠 IgG1。

由于常用的一抗均為 IgG 類免疫球蛋白，綜合考慮市場(chǎng)需求，Cloud-Clone Corp.優(yōu)先推出的二抗產(chǎn)品均為針對(duì)與各種物種的 IgG 類免疫球蛋白。

另外，公司有近千種針?不同目的蛋白的兔多抗產(chǎn)品，配合其使用，公司 推出 USCNsabc01，即用型豚鼠抗兔 SABC 試劑盒，可適用于 IHC 實(shí)驗(yàn)以顯示 代測(cè)目的抗原的?布。由于該試劑盒采用鏈霉親和素—生物素—過(guò)氧化物酶復(fù) 合物技術(shù), 高倍數(shù)的放大檢測(cè)信號(hào)，提高檢測(cè)靈敏度。在 IHC 實(shí)驗(yàn)中，若一抗 為兔源的多克隆抗體，不妨考慮選用 USCNsabc01。

2. 根據(jù)檢測(cè)方案選擇二抗標(biāo)記物

一般來(lái)說(shuō)，偶聯(lián)于二抗的標(biāo)記物有酶、生物素和熒光基團(tuán)等。標(biāo)記物的選 擇取決于實(shí)驗(yàn)的類型。對(duì)于 western blot 和 ELISA，通常選用酶標(biāo)二抗，而免疫 組織化學(xué)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)中常使用熒光基團(tuán)標(biāo)記二抗。

公司自主制備的二抗產(chǎn)品，根據(jù)標(biāo)記物的不同分為三類，辣根過(guò)氧化物酶 （horse radishperoxidase, HRP），生物素（biotin）和異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）標(biāo)記二抗。

辣根過(guò)氧化物酶（horse radishperoxidase, HRP）標(biāo)記二抗

HRP（Horseradish Peroxidase，辣根過(guò)氧化物酶）是一種分子量達(dá) 44000 的 糖蛋白，由無(wú)色的酶蛋白和深棕色的鐵卟啉結(jié)合而成，通常來(lái)源于辣根植物中， 由于其易于提取、價(jià)格相對(duì)低廉，同時(shí)性質(zhì)穩(wěn)定，耐熱及有機(jī)溶劑的作用，與 抗原或抗體偶聯(lián)后，活性很少受損失，因此是迄今為止在免疫學(xué)中應(yīng)用最為廣 泛的一種標(biāo)記用酶。介于辣根過(guò)氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)比活性 高，穩(wěn)定，HRP 標(biāo)記二抗廣泛應(yīng)用于免疫組化，western blot 和 ELISA 中.

生物素（biotin）標(biāo)記二抗

    生物素偶聯(lián)的抗體與親和素-酶高親合力的牢固結(jié)合，形成Biotin-Avidin system有多級(jí)放大效應(yīng)，使免疫標(biāo)記和有關(guān)示蹤分析更加靈敏?？捎糜贓LISA、Western Blot、IHC、IHF、IHP實(shí)驗(yàn)。

異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）標(biāo)記二抗

    異硫氰酸熒光素(FITC)能和各種抗體蛋白結(jié)合，結(jié)合后的抗體不喪失與一定抗原結(jié)合的特異性，并在堿性溶液中具有強(qiáng)烈的黃綠色熒光。通過(guò)在熒光顯微鏡下觀察或流式細(xì)胞儀分析可對(duì)相應(yīng)抗原進(jìn)行定性、定位或定量的檢測(cè)。可用于免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫熒光(ICC/IF)實(shí)驗(yàn)

公司一直致力于提供高品質(zhì)和品種多樣的二抗產(chǎn)品， 研究者們可以綜合考慮各種影響因素，選擇合適的二抗，取得理想的檢測(cè)結(jié)果。 另外，公司仍在持續(xù)研究其他標(biāo)記二抗，產(chǎn)品推出后，我們會(huì)不斷更新二抗產(chǎn)品目錄，敬請(qǐng)關(guān)注。

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