隨著PCR技術(shù)的出現(xiàn)，人們逐漸的打開通往研究生命本質(zhì)的大門，這也使PCR技術(shù)成為了上個世紀最為偉大的技術(shù)之一。通過PCR技術(shù)能在體外迅速、大量、靈敏地擴增出目的基因片段，但是需要靈活的改造基因，只有目的基因片段是遠遠不夠的，還需要一種高效的基因加工手段——基因拼接技術(shù)。在實驗操作過程中，無論出于基因改造、載體改造以及將來會出現(xiàn)的物種改造等多種涉及DNA操作的實驗，都不可避免會使用到基因拼接技術(shù)。

     1989年Horton等人提出了SOE法（Gene splicing by over lap extension）即通過復(fù)制時DNA鏈的交錯延伸來實現(xiàn)基因拼接；1991年Lebedenko等人提出SDL方法（Gene splicing by directed ligation）即直接拼接法。目前常用的基因拼接技術(shù)大多數(shù)是基于這兩種方式發(fā)展而來，這些方法雖然能夠完成基因的拼接，但是表現(xiàn)出來的問題也非常多，主要表現(xiàn)在以下幾個方面：1、外源片段的引入；2、基因出現(xiàn)移碼突變；3、操作繁瑣，拼接成功率低；4、一個反應(yīng)通常只能完成2個片段的拼接。

針對這一系的問題，武漢云克隆在核酸酶及其反應(yīng)體系上經(jīng)過逾7年的研發(fā)，推出了一種高效多基因拼接技術(shù)以及配套的技術(shù)體系，打破了傳統(tǒng)拼接技術(shù)的種種限制，主要表現(xiàn)在以下幾個方面：1、在同一個反應(yīng)體系中能同時完成3-5個基因片段拼接；2、對于拼接片段適用性廣，200-8000bp的片段都能用于拼接；3、拼接成功率高，普通兩兩拼接≥85%；4、不會帶入任何的外源序列。該技術(shù)主要特征在于（如圖所示），在反應(yīng)體系中一種核酸酶能非特異的識別DNA 5’-3’端的14-20bp的堿基，并沿5’-3’進行消化，使DNA形成粘性末端，在退火的情況下粘性末端通過堿基互補配對鏈接形成一個整體。

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