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細胞自噬標(biāo)志物L(fēng)C3

一年一度的諾貝爾獎如期拉開帷幕,2016年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予了日本科學(xué)家大隅良典,以表彰他對細胞自噬機理的發(fā)現(xiàn)。早在上世紀(jì)50年代,比利時科學(xué)家杜夫通過電鏡觀察到自噬體結(jié)構(gòu),并首先提出了“自噬”這種說法。

自噬是一個吞噬自身細胞質(zhì)蛋白或細胞器并使其包被進入囊泡,并與溶酶體融合形成自噬溶酶體,降解其所包裹的內(nèi)容物的過程,以實現(xiàn)細胞穩(wěn)態(tài)和細胞器更新。這個過程以溶酶體封閉小室為終點結(jié)束。圖1即形象地描述了細胞自噬的機理。通俗地說,細胞可以通過降解自身的非必需成分來提供能量和營養(yǎng),也可以降解一些毒性成分以阻止細胞損傷和凋亡。目前的檢測金標(biāo)準(zhǔn)是通過電鏡觀察膜狀結(jié)構(gòu)的自噬體以及檢測自噬標(biāo)志物L(fēng)C3。雖然電鏡可直接觀察到自噬,但由于需要電鏡設(shè)備和一定的實驗技能,其無法滿足所有研究者的需要,所以更常見的是檢測自噬標(biāo)志物L(fēng)C3。理解細胞自噬對認(rèn)識衰老、分化及發(fā)育、免疫及清除微生物、腫瘤等疾病的病理生理過程有重要意義。

圖 1. 細胞自噬機理的模式圖 (源引自:Nobelprize.org Database)

LC3最初發(fā)現(xiàn)時被認(rèn)為是微管關(guān)聯(lián)蛋白1A和1B (microtubule- associated proteins 1A and 1B),被稱為MAP1LC3,隨后發(fā)現(xiàn)LC3與酵母蛋白Apg8/Aut7/Atg8具有較高相似性,并在自噬過程中起重要作用。哺乳動物中LC3有3種亞型,包括LC3A、LC3B和LC3C,它們在自噬過程中存在相關(guān)的翻譯后修飾。自噬發(fā)生過程中,LC3蛋白合成后立即在其羧基端被Atg4所剪切,產(chǎn)生細胞漿定位的LC3-I。在自噬過程中,LC3-I會被包括Atg7和Atg3在內(nèi)的泛素樣體系所修飾和加工,產(chǎn)生分子量為14kD的LC3-II,并定位到自噬小體中。這樣,自噬小體中存在的LC3和LC3-II都被當(dāng)做細胞發(fā)生自噬的分子標(biāo)志,并且LC3-II的含量和發(fā)生自噬的程度成正比,C3-II/I比值的大小可估計自噬水平的高低。由于LC3A作為LC3的一種,同樣可以用作自噬的分子標(biāo)志物。

云克隆公司開發(fā)了針對LC3A的重組蛋白(RPL701Hu01、RPL701Ra01)、抗體(MAL701Hu21、 MAL701Ra21、PAL701Hu01、PAL701Ra01)以及ELISA試劑盒(SEL701HuSEL701Ra),可供廣大科研工作者選擇使用,為科研用戶研究自噬相關(guān)機制提供了良好的實驗平臺。

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