隨著基因工程抗體的研發(fā)，scFv（single-chain fragment variable）在理論和實(shí)際應(yīng)用方面的研究引起了越來(lái)越廣泛的關(guān)注。與經(jīng)典抗體分子相比，scFv具有分子量?。s占完整抗體分子的1/6）的特征，也被認(rèn)為是具有抗體生物活性的最小功能單位。scFv是由抗體重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)通過(guò)15～20個(gè)氨基酸的短肽連接而成，不含F(xiàn)c片段，屬于小分子基因工程抗體。scFv最早是在酵母和植物細(xì)胞中成功表達(dá)并獲得，能夠自發(fā)折疊，形成天然結(jié)構(gòu)，具有抗原結(jié)合特性。scFv在抗病毒、腫瘤治療、自身免疫病治療，靶向藥物治療等等方面有巨大的應(yīng)用前景。

scFv具有抗原結(jié)合特性、穿透力強(qiáng)、體內(nèi)半衰期短、免疫原性低、可在原核細(xì)胞系統(tǒng)表達(dá)以及易于進(jìn)行基因工程操作等特點(diǎn)，對(duì)其開(kāi)展的研究也是異?；馃?。目前多使用的是噬菌體表面展示技術(shù)制備scFv，制備過(guò)程如下：

1.抗體基因的克隆及重組。一般利用抗體可變區(qū)基因骨架區(qū)的特異性簡(jiǎn)并引物，通過(guò)PCR擴(kuò)增出抗體重鏈和輕鏈可變區(qū)的基因，通過(guò)接頭linker拼接成完整的scFv基因。

2.抗體基因表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)。擴(kuò)增成功的scFv基因轉(zhuǎn)入噬菌粒載體，并轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，構(gòu)建噬菌體單鏈抗體庫(kù)。

3.噬菌體單鏈抗體庫(kù)的富集、篩選。通常是用固相化的抗原與噬菌體抗體庫(kù)孵育，通過(guò)數(shù)次吸附、洗滌、洗脫、擴(kuò)增過(guò)程，可使特異的噬菌體得到109的富集，每一個(gè)噬菌體代表了一個(gè)抗體。

4.scFv單鏈抗體的可溶性表達(dá)。在單鏈抗體基因構(gòu)建中，單鏈抗體基因C末端可引入c-Myc、組氨酸、GST、MBP、脂類標(biāo)簽等，使表達(dá)產(chǎn)物更易于檢測(cè)和純化。

Cloud-Clone Corp.經(jīng)過(guò)多年的努力，已初步建立并擁有完整的單鏈抗體scFv制備平臺(tái)（如圖所示）。

Cloud-Clone Corp.打破傳統(tǒng)單克隆和多克隆抗體制備工藝的限制，可為科研型客戶和工業(yè)級(jí)客戶提供最為優(yōu)秀和全面的抗體制備服務(wù)。更多產(chǎn)品信息，請(qǐng)點(diǎn)擊訪問(wèn)：www.cloud-clone.com。