輕松揮去生物制品中的煩惱——內(nèi)毒素
內(nèi)毒素看似高深莫測,其實我們每個人對他都并不陌生,很多出現(xiàn)過細菌感染的人群更對他記憶深刻,因為細菌感染后高燒的罪魁禍首便是內(nèi)毒素。內(nèi)毒素,也稱為脂多糖或LPS,是革蘭氏陰性細菌(例如大腸桿菌)的細胞膜組分。當(dāng)細菌死亡后,便有大量的內(nèi)毒素釋放出來,這部分內(nèi)毒素如果進入動物血液循環(huán)系統(tǒng),一方面會大面積的損傷健康細胞,另一面會引起強烈的免疫反應(yīng),這便是為什么細菌感染后會出現(xiàn)高燒甚至死亡的原因。由此可見,內(nèi)毒素對生物體及細胞的傷害性,因此國家對藥品特別是注射類藥物作出了明確的內(nèi)毒素去除的要求,同樣實驗室直接用于細胞培養(yǎng)、注射實驗動物等試劑也必須限制內(nèi)毒素含量。內(nèi)毒素儼然已成為生物制品制備的最大的煩惱之一。
多粘菌素B(PMB)是由多粘芽胞桿菌(Bacilluspolymyxa)產(chǎn)生的一組多肽類抗生素,能夠特異性的抓取試劑中的細菌內(nèi)毒素,但是又不會抓取試劑中的其他成分,由此而開發(fā)的產(chǎn)品被認為是目前市面上最為有效的去內(nèi)毒素產(chǎn)品。多粘菌素B通常被連接在CNBr-Sepharose上面做成預(yù)裝柱(IS002),方便小批量的去除內(nèi)毒素,使樣品中的內(nèi)毒素含量低于1.0EU /ug,能滿足多種實驗需要,但是這種方法操作比較復(fù)雜,對于大批量去除內(nèi)毒素它就有點力不從心了。針對這種情況,我們對內(nèi)毒素分子的特性做了更為詳細的分析,研發(fā)了一款操作簡便、且適用于大批量樣本去除內(nèi)毒素的試劑(IS070),該產(chǎn)品主要通過物理的方法將內(nèi)毒素直接萃取出來,無需進行過柱處理,簡單快捷,并且去除內(nèi)毒素的效果與多粘菌素B類產(chǎn)品一致,經(jīng)過此方法去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品可以直接用于動物實驗。不過這個方法也有一定的缺陷,那就是需要蛋白的耐熱性好,并且不適用于脂溶性的樣本中內(nèi)毒素的去除。所以實驗人員可以依據(jù)樣本的物理、化學(xué)特性以及實驗的用途選擇不同的方式對樣本進行內(nèi)毒素的去除。
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