蛋白活性實驗-SCF活性蛋白
蛋白活性實驗-SCF活性蛋白
干細(xì)胞因子(SCF),也稱為肥大細(xì)胞生長因子(MGF)和鐵因子(SLF),在造血、精子和黑色素生成中起著重要作用。SCF已被證明可以刺激TF-1細(xì)胞的增殖。
實驗方法:測試這種效果,將TF-1細(xì)胞被接種在96 孔板上,密度1 x 104細(xì)胞/孔,重復(fù)3孔。在不同濃度SCF中37°C孵育72 h,檢測不同濃度的SCF。在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長,細(xì)胞計數(shù)以細(xì)胞計數(shù)(CCK-8)測定細(xì)胞增殖。簡要來說,每孔添加10μl CCK-8,于37°C孵育1 - 4小時,然后在450 nm處測量吸光度。
實驗結(jié)果:用倒置顯微鏡觀察添加SCF孵育72h后,TF-1細(xì)胞的細(xì)胞增殖情況如圖1所示。
A B
Figure 1. Cell proliferation of TF-1 cells after stimulated with SCF .
(A) TF-1 cells cultured in RPMI-1640, stimulated with 10ng/ml SCF for 72h;
(B) Unstimulated TF-1 cells cultured in RPMI-1640 for 72h.
SCF的劑量效應(yīng)曲線如圖2所示。很明顯,它顯著促進了TF-1細(xì)胞的增殖,而ED50的效果通常是6.07到13.69ng/ml。
Figure 2. The dose-effect curve of SCF on TF-1 cells