實驗原理：

Glutathione S Transferase Pi (GSTp)谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶是體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化最重要的Ⅱ相代謝酶之一，是細(xì)胞抗損傷、抗癌變的主要解毒系統(tǒng)。它能催化機體內(nèi)有害極性化合物與谷胱甘肽結(jié)合，防止DNA損害，還可以由非酶結(jié)合方式將體內(nèi)各種潛在毒性化學(xué)藥物從體內(nèi)排出。GSTp能催化內(nèi)源性谷胱甘肽與1-氯-2,4-二硝基苯（CDNB）結(jié)合形成2,4-二硝基苯-谷胱甘肽復(fù)合物，在340nm處有吸收峰。因此，測定產(chǎn)物生成量可反映GSTp的活性。

試劑：

100mM NaH2PO4 緩沖液，pH7.0

200mM L-谷胱甘肽（還原型）

100mM 1-氯-2,4-二硝基苯（CDNB）

實驗步驟：

1.取980μl 緩沖液(100mM NaH2PO4，pH7.0)，分別加入10μl 配制好的L-谷胱甘肽（還原型）和10μl的CDNB，混勻后得到底物混合液。

2.取100μl底物混合液在微量比色皿中進(jìn)行調(diào)零。

3.將50μl底物混合液與50μl用緩沖液稀釋后的重組大鼠GSTp混勻。

4.在5min內(nèi)測量OD340nm值。

結(jié)果計算：

GSTp的比酶活以1mg蛋白1min內(nèi)產(chǎn)生1μmol復(fù)合物表示。

GSTp比酶活=

（εmM=9.6mmol/(L·cm)，為CDNB與谷胱甘肽復(fù)合物在340nm下的摩爾吸光系數(shù)）

經(jīng)檢測，云克隆活性蛋白——大鼠重組GSTp（貨號：APB090Ra01）的比酶活為4.025，即，1mg的APB090Ra01在1min內(nèi)可生成4.025μmol復(fù)合物。