談到腸道疾病的檢測，大家自然會想到讓人痛苦不堪的腸鏡測定。然而隨著這個來自糞便的炎性指標(biāo)物應(yīng)用于炎性腸病臨床診斷后，大幅度減少了患者消化內(nèi)鏡測定的頻率，極大程度地減輕病患的痛苦。是什么物質(zhì)具有如此神奇的魔力呢？今天，小云和大家一起一窺究竟，拔草炎性腸病的新興標(biāo)志物-鈣衛(wèi)蛋白（Calprotectin）。在這里先公布一個好消息，《Gastroenterology》上發(fā)表了一篇文章（圖1），研究者采用云克隆鈣結(jié)合蛋白S100家族因子試劑盒測定直腸癌病人S100A6, S100A8, S100A9及S100A11, 揭示這些鈣結(jié)合蛋白S100家族因子與直腸癌的關(guān)聯(lián)。

“小身板”里的“大能量”

Calprotectin也是鈣結(jié)合蛋白S100家族的重要成員之一。鈣結(jié)合蛋白S100家族擁有20余個家族成員，分子量較?。?-14kD），它們不喜歡單獨(dú)呆著，多數(shù)以同源二聚體形式存在，也有少數(shù)形成異源二聚體、三聚體和四聚體，只有在特殊情況下才以單體的形式單獨(dú)存在。而今天的主人翁Calprotectin分子量雖小，僅24kD^[1]，結(jié)構(gòu)卻不簡單。它是由一條10kD的S100A8及一條13kD的S100A9形成的異源二聚體S100A8/A9蛋白復(fù)合物。兩個S100A8/A9二聚體也可形成四聚體結(jié)構(gòu)（圖2）?；谶@類特殊結(jié)構(gòu)，采用普通表達(dá)系統(tǒng)無法體外表達(dá)Calprotectin，需要使用共表達(dá)系統(tǒng)。感興趣的話，可了解云克隆Recombinant Calprotectin (CALPRO)！

Calprotectin個頭雖小，能量卻不可小覷。為什么這么說呢？以下羅列幾點(diǎn)，歡迎圍觀。

1. 分布廣。

Calprotectin廣泛存在于組織，細(xì)胞，體液甚至是排泄物中。研究表明，在血漿、尿液、糞便、腦脊液、唾液、滑膜液以及結(jié)腸活檢^[2] 中均可檢出Calprotectin。在不同部位，Calprotectin含量差異較大。健康人血漿中Calprotectin的含量是0.1-0.6mg/L，病毒感染患者變化至0.1-11.4mg/L, 細(xì)菌感染患者升高至0.6-11.0mg/L ^[3]。對于健康成人，糞便中的Calprotectin含量大約是血漿中Calprotectin含量的6倍^[4]。

2. 生物學(xué)功能強(qiáng)大。

Calprotectin不僅在機(jī)體內(nèi)分布廣，還具有多種生物學(xué)功能，包括參與機(jī)體免疫調(diào)節(jié)反應(yīng)^[5]；抗微生物活性^[6]；抗增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；參與細(xì)胞信號傳遞，參與炎癥反應(yīng)^[7]等。提到Calprotectin的功能，不得不說個題外話。最早鈣衛(wèi)蛋白（Calprotectin）被命名為L1蛋白，之后研究發(fā)現(xiàn)它與鈣離子結(jié)合后，具抗微生物活性，是保護(hù)機(jī)體防御炎癥的衛(wèi)斗士，因而得名。

3. 與疾病關(guān)聯(lián)密切。

Calprotectin主要來源于中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，占細(xì)胞內(nèi)可溶性胞質(zhì)蛋白的60%^[8]，是一種有效的中性粒細(xì)胞趨化因子。如果把中性粒細(xì)胞比作機(jī)體防御炎癥的士兵，那么Calprotectin無疑就是它殺敵制勝的法寶了。一旦機(jī)體發(fā)生炎癥，防御炎癥的士兵——中性粒細(xì)胞會被派遣遷移至炎癥區(qū)，活化脫顆粒并釋放出大量Calprotectin。因此，Calprotectin水平的變化和炎性疾病的進(jìn)展有一定的相關(guān)性^[9，10]。研究證實(shí)，炎性腸病患者糞便中Calprotectin的含量明顯增高，且增高程度與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)^[11]。也有研究表明外周血Calprotectin水平與急性闌尾炎有相關(guān)性，理論上可作為診斷急性闌尾炎的生物標(biāo)志物^[12]。另外，心肌梗死患者血清中Calprotectin水平在急性發(fā)作期會顯著升高，它可以作為一個新的重要的預(yù)測急性缺血性心臟病的生物學(xué)指標(biāo)^[13]。對于自身免疫性疾病，Calprotectin也可作為指標(biāo)物預(yù)示機(jī)體損傷程度。對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的研究發(fā)現(xiàn)，血漿Calprotectin水平變化與患者關(guān)節(jié)損傷級別具有很好的相關(guān)性^[14]。血漿Calprotectin水平變化亦能反映系統(tǒng)性紅斑狼瘡病患感染或惡化程度，可作為疾病活動期指標(biāo)，用于指導(dǎo)臨床的診斷和治療^[15]。

隨著研究的深入，Calprotectin與腫瘤的關(guān)聯(lián)研究也逐漸成為熱點(diǎn)。通過對比糞便Calprotectin水平和大便潛血測定、結(jié)腸鏡病理檢查發(fā)現(xiàn)，糞便Calprotectin對于良惡性腫瘤診斷具有較好的敏感度，不過特異性略差^{[16，17]}。另有研究表明，聯(lián)合運(yùn)用學(xué)血清Calprotectin，CD26和EGF對疑似肺癌患者進(jìn)行檢測，可大幅度提高肺癌臨床診斷的準(zhǔn)確性^[18]。

4. 臨床應(yīng)用廣。

近年來，Calprotectin的測定主要用作炎性腸病臨床診斷的輔助性參考依據(jù)。在對于炎性腸病的臨床測定中，糞便Calprotectin具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢，可以間接定量評估炎性腸病的嚴(yán)重程度，還能區(qū)分功能性和器質(zhì)性腸道疾病。首先不得不提的是，糞便Calprotectin與炎性腸病的密切相關(guān)性。通過臨床、內(nèi)鏡和組織學(xué)測定結(jié)果表明糞便Calprotectin水平與炎性腸病活動程度密切相關(guān)，可作為敏感而非侵入性的檢測指標(biāo)監(jiān)測慢性腸道炎癥。

雖然Calprotectin是一個可靠的炎癥標(biāo)志物，在許多炎癥情況下均會升高，但是血清中的Calprotectin水平卻并不具備特異性，因?yàn)樗纳咧荒苷f明有炎癥但不能定位炎癥發(fā)生的地方。而糞便中的Calprotectin水平升高^[19,20]則能準(zhǔn)確指向腸道炎癥，當(dāng)腸道存在炎癥反應(yīng)時，中性粒細(xì)胞活化，釋放大量Calprotectin，其水平甚至能達(dá)到正常值的5~40倍。

除了與炎癥性疾病的緊密相關(guān)性外，Calprotectin在糞便中含量高，約為血漿中6倍，易被檢出。

Calprotectin還具有耐熱性及耐水解性，穩(wěn)定性好，室溫下能夠穩(wěn)定存在大約7天^[21]，不會被細(xì)菌和酶類破壞，也不受飲食影響^[22]。

最后一點(diǎn)也非常重要，Calprotectin臨床測定無創(chuàng)方便，能實(shí)時有效地監(jiān)控長病程的腸道疾病，使得長期飽受炎性腸病折磨的患者們免于頻繁的侵入性腸鏡檢測。無創(chuàng)性對于炎性腸病嬰幼兒患者尤為重要，通過檢測糞便中Calprotectin即可反映疾病嚴(yán)重程度。

可見，糞便Calprotectin的測定是集疾病相關(guān)性、易操作性、高穩(wěn)定性以及無創(chuàng)性于一體的檢測手段。

Calprotectin在腸道疾病診斷方面的得到了大力應(yīng)用，而它與其它炎性疾病的關(guān)系暫時處于研究階段，暫未用于臨床測定，研究工作仍在進(jìn)行著。期待在科研工作者們的持續(xù)探索下，Calprotectin能夠綻放出更加璀璨的光芒。

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云克隆一直致力于研制值得信賴的科研用檢測試劑及臨床檢測試劑原料，助力探索Calprotectin與疾病的關(guān)系，為炎性疾病臨床診斷提供更多有意義的依據(jù)，挖掘Calprotectin在臨床方面更為深入的應(yīng)用。

為了回饋一如既往支持我們的研究者們，我們整理了鈣結(jié)合蛋白S100家族因子試劑的SCI文獻(xiàn)，期望能給您的科研助力。 

表1. 鈣結(jié)合蛋白S100家族因子檢測試劑部分SCI文獻(xiàn)

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