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活性蛋白巨噬細胞炎性蛋白1β的促趨化作用


巨噬細胞炎性蛋白1β(Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta, MIP-1β),又稱CCL4,主要與CCR5受體特異性結(jié)合的趨化因子,能特異性趨化淋巴細胞、單核細胞向炎癥部位遷移。本實驗通過檢測MIP-1β對人急性T細胞白血病細胞系Jurkat的趨化作用來評估人重組MIP-1β蛋白的活性。

 

實驗方案:
將100uL Jurkat細胞懸液(5×105 cells/mL in RPMI 1640 with FBS free)鋪板與培養(yǎng)小室上室,不同濃度的人重組MIP-1β蛋白(0.0001ng/mL, 0.001ng/mL, 0.1ng/mL, 1ng/mL, 10ng/mL, 100ng/mL diluted separately in serum free RPMI 1640)置于培養(yǎng)小室下室,兩室之間使用聚碳酸酯濾膜隔開,孵育2h后,移除濾膜并在倒置顯微鏡下觀察并計數(shù)細胞遷移數(shù)。顯微鏡下觀察遷移的Jurkat細胞如下圖:

A. Jurkat細胞接種于上室,0.01ng/mL的 MIP-1β重組蛋白溶于無血清的1640培養(yǎng)基中置于下室,共培養(yǎng)2h后,倒置顯微鏡下觀察下室的細胞。

B. Jurkat細胞接種于上室,無血清的1640培養(yǎng)基中置于下室,共培養(yǎng)2h后,倒置顯微鏡下觀察下室的細胞。

 

結(jié)論:

人重組MIP-1β蛋白能促進Jurkat細胞的趨化作用。

 

產(chǎn)品信息:http://www.cloud-clone.com/products/APA093Hu02.html