Q1 蛋白如何保存和重懸？

A1 蛋白的保存方法：如下圖，參見(jiàn)說(shuō)明書[STORAGE AND STABILITY]，在推薦的條件下冷凍儲(chǔ)存，蛋白自收到之日起至少12個(gè)月內(nèi)保持穩(wěn)定。重懸后，如需長(zhǎng)期保存，建議分裝后，-80℃冷凍保存，避免反復(fù)凍融。

蛋白的重懸：如下圖，參見(jiàn)說(shuō)明書[USAGE]。應(yīng)選用推薦的buffer，并按產(chǎn)品說(shuō)明書推薦的重懸濃度重懸蛋白。確定蛋白質(zhì)量后，通過(guò)將質(zhì)量除以濃度來(lái)計(jì)算體積（濃度=質(zhì)量/體積）。例如，一瓶100μg的蛋白需要重懸至蛋白濃度500μg/mL。通過(guò)計(jì)算：100μg/500μg/mL=0.2mL，因此要獲得該濃度的蛋白需向瓶中加入0.2mL（200μL）的蛋白buffer。

Q2 重組蛋白凍干前的buffer和濃度？

A2 蛋白凍干前的buffer和濃度：參見(jiàn)說(shuō)明書[PROPERTIES]中的“Buffer formulation”和“Original Concentration”。見(jiàn)下圖，蛋白凍干前的濃度為450μg/mL，蛋白凍干前的buffer是“PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose”。

Q3 重組蛋白分子量大小和全長(zhǎng)不同的原因？

A3 ① 重組蛋白可能僅包含了蛋白的片段，而非全長(zhǎng)。請(qǐng)查看說(shuō)明書[PROPERTIES]中的“Residues”，這部分展示了重組蛋白的序列信息。如下圖，蛋白序列為Val25~Glu352。

 ② 重組蛋白包含蛋白標(biāo)簽，重組蛋白的分子量是靶標(biāo)蛋白和蛋白標(biāo)簽分子量的和。不同的蛋白標(biāo)簽分子量大小不同。說(shuō)明書[PROPERTIES]中的“Tags”部分展示了重組蛋白的標(biāo)簽信息。如下圖，重組蛋白帶有N端His Tag。

Q4 重組蛋白可以用于活性實(shí)驗(yàn)嗎？

A4 對(duì)于重組蛋白，我們暫未檢測(cè)其活性，不確定蛋白是否具備活性。如果客戶想要用于活性實(shí)驗(yàn)，可以先做預(yù)實(shí)驗(yàn)。以RPA124Mu01為例。

產(chǎn)品鏈接：

https://www.cloud-clone.com/manual/Recombinant-Transforming-Growth-Factor-Beta-1-(TGFb1)-RPA124Mu01.pdf

對(duì)于活性蛋白，可以參考說(shuō)明書[ACTIVITY]，給出了活性驗(yàn)證方案和結(jié)果。以APA899Hu61為例。

產(chǎn)品鏈接：

https://www.cloud-clone.com/manual/Active-Osteopontin-(OPN)-APA899Hu61.pdf

如果客戶是用于其他的活性實(shí)驗(yàn)，與我們驗(yàn)證的方案不同，請(qǐng)先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。

Q5 重組蛋白的buffer可以更換嗎？

A5 如果客戶對(duì)于蛋白buffer有特殊要求，除了產(chǎn)品頁(yè)面上顯示的buffer，云克隆還接受定制配方（不含tris、不含skl等）。請(qǐng)聯(lián)系云克隆銷售團(tuán)隊(duì)/當(dāng)?shù)氐姆咒N商，分享您的請(qǐng)求就能獲取解決方案。

Q6 重組蛋白是carrier free還是animal free?

A6 重組蛋白產(chǎn)品是“carrier free” & “animal free”。

Q7 我收到蛋白產(chǎn)品時(shí)溫度已接近室溫，但產(chǎn)品標(biāo)簽和數(shù)據(jù)顯示它將在-80oC下儲(chǔ)存。這是一個(gè)錯(cuò)誤嗎？產(chǎn)品活性是否會(huì)受到影響？

A7 蛋白產(chǎn)品可在室溫下運(yùn)輸，不會(huì)受到影響。凍干提高了產(chǎn)品的穩(wěn)定性，同時(shí)減少了包裝材料和運(yùn)輸費(fèi)用。我們對(duì)凍干產(chǎn)品進(jìn)行了“加速穩(wěn)定性測(cè)試”，數(shù)據(jù)表明，7天內(nèi)室溫運(yùn)輸?shù)膬龈僧a(chǎn)品可保持完全活性。我們將保證并支持在該時(shí)間段內(nèi)交付并妥善儲(chǔ)存的產(chǎn)品性能。如果產(chǎn)品未在7天內(nèi)送達(dá)，或在收到后未正確儲(chǔ)存，請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)人員獲取解決方案。

Q8 訂購(gòu)了50μg蛋白，但是收到的蛋白量明顯高于50μg。這是一個(gè)錯(cuò)誤嗎？

A8 瓶中的粉末是靶標(biāo)蛋白以及蛋白緩沖液鹽離子。凍干前蛋白溶解在蛋白緩沖液中，凍干僅去除了水分，緩沖液中的鹽離子和靶標(biāo)蛋白形成了粉末。所以瓶中的物質(zhì)質(zhì)量比訂購(gòu)的蛋白量（50μg）多。

Q9 蛋白稀釋液能訂購(gòu)嗎？

A9 可以訂購(gòu)蛋白稀釋液。

產(chǎn)品鏈接：https://www.cloud-clone.com/incrementServices/IS119.html

Q10 除了產(chǎn)品說(shuō)明書上列出的應(yīng)用，蛋白還能用于其他應(yīng)用嗎？

A10 對(duì)于未列出的應(yīng)用，并不代表該應(yīng)用不適用，只是暫時(shí)未驗(yàn)證。請(qǐng)廣大客戶自行驗(yàn)證，對(duì)蛋白應(yīng)用進(jìn)行擴(kuò)展。完成實(shí)驗(yàn)分享數(shù)據(jù)，我們可以提供獎(jiǎng)勵(lì)。

Q11 云克隆可以提供蛋白產(chǎn)品定制服務(wù)嗎？

A11 武漢云克隆為客戶提供從基因到蛋白的一站式服務(wù)，客戶也可以根據(jù)自身的需求靈活的選擇服務(wù)項(xiàng)目或個(gè)性化的定制服務(wù)。目前云克隆建有原核（E.coli）表達(dá)系統(tǒng)與真核（酵母、桿狀病毒一昆蟲細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞）表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)平臺(tái)。我們將在不斷創(chuàng)新和改進(jìn)的基礎(chǔ)上，始終致力于為每一位客戶提供最全面、最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。

蛋白定制流程：

基因克隆或者基因合成 →亞克隆質(zhì)粒構(gòu)建 →表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建 →表達(dá)條件優(yōu)化 →蛋白表達(dá) →蛋白純化 →后期處理：去除內(nèi)毒素、融合標(biāo)簽切除、活性測(cè)定等。

Q12 如何從蛋白產(chǎn)品說(shuō)明書中獲取有效信息？

A12 客戶咨詢的很多問(wèn)題都能在產(chǎn)品說(shuō)明書中找到。如蛋白來(lái)源，表達(dá)宿主，蛋白片段，蛋白標(biāo)簽，蛋白純度，凍干前buffer，凍干前濃度，蛋白應(yīng)用，等電點(diǎn)，蛋白分子量，蛋白用法（重懸方法），保存方法，以及驗(yàn)證結(jié)果圖。

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